pod愈创木酚溶液配制（愈创木酚pod的测定方法）

触酶试验的原理

1、该试验原理是基于某些微生物细胞内含有的过氧化氢酶（触酶）活性。触酶试验原理具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢生成水和新生态氧，继而形成分子氧出现气泡。革兰阳性球菌中，葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶，而链球菌属为阴性，故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。

2、触酶试验原理：触酶又称过氧化氢酶，具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢成为水和原子态氧，继而形成氧分子，出现气泡。

3、分解过氧化氢。在触酶试验中，将一滴3%的过氧化氢滴在玻片上，然后用接种环挑起一环待检菌于过氧化氢中，等待一段时间后观察结果。如果产生气泡，则为触酶阳性，说明该菌能产生过氧化氢酶，进而分解过氧化氢。

4、触酶试验是一种常见的生物学实验方法，用于检测和确定某种物质是否具有酶活性。酶是一类可以催化生物体内化学反应的蛋白质，能够加速反应速率，从而促使生物体内许多生化过程的发生。触酶试验可以通过观察和测量待测物质与酶的相互作用产生的化学反应，来判断待测物质是否具有酶活性。

什么是愈创木实验

准确的说是愈创木酚 愈创木酚法测定活性酶定操作 实验目的 过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性不断发生变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物体内代谢的变化。

常用检查方法为愈创木法。这是一种用化学试剂（即愈创木）检测粪便中的血红蛋白及其产物的方法，结果以阴性、阳性表示。阴性表示无出血，阳性为有出血，加号越多表明出血量越大。这种方法很灵敏，每日出血量5毫升时即可出现阳性反应。

愈创木，又称作愈疮木，是一种具有独特特性和广泛用途的木材。愈创木主要产自南美洲的特定区域，以其出色的耐用性和稳定性而闻名。这种木材的心材部分呈现出深色并且可能会有更强烈的焦糖化和焦糖风味。

愈创木酚法测定种子纯度的原理与结果判断方式。原理，大豆种皮内的过氧化物酶可催化过氧化氢分解产生游离氧基，游离氧基可使无色的意创木酚氧化产生红褐色的邻甲氧基对苯配。结果判断方式，种皮内含有的过氧化物酶活性越高，单位时间内产生的红褐色的邻甲氧基对苯越多，溶液的颜色越深。

为什么过氧化物酶可作为果蔬热汤是否充分的指标?

1、过氧化物酶属于最耐热的酶类，在果蔬加工中常被当作热处理是否充分的指标。Pod的测定方法：方法：将已热处理的原料中抽取样品，横切，随即放入愈创木酚或联苯胺溶液中，然后取出，在切面上滴0.3%H2O2，数分钟后，用愈创木酚处理的样品变为褐色，联苯胺变为深蓝色，说明过氧化物酶未被破坏，热处理时间不够，如果均不变色，则表示热处理效果良好。

2、热汤时间对过氧化物酶的影响是：活性变化，甚至遭到完全破坏；原因是：过氧化物酶无法承受高温。过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶，它们能催化很多反应。过氧化物酶是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。

3、绿豆绿豆富含B族维生素、葡萄糖、蛋白质、淀粉酶、氧化酶，其性味甘凉，能降低血液中的胆固醇和防治动脉粥样硬化 香瓜 香瓜富含过氧化物酶，有消暑热、解烦渴、清肺热、止咳、益气、利便之功效。适宜于肾病、胃病、咳嗽痰喘、贫血和便秘等症。

4、荷叶中的生物碱可以扩张血管，清热解暑，有降血压的作用。

5、丰富的营养成分奠定健康基础薏米含有碳水化合物、蛋白质、脂肪三大基础能量物质，同时富含多种人体必需的微量元素和维生素：微量元素：钙（Ca）、镁（Mg）、磷（P）、铁（Fe）、锌（Zn）等含量突出。

关于过氧化物酶(pod)活性测定(愈创木酚法)

果蔬中过氧化物酶活性的测定主要通过愈创木酚法进行。具体方法和注意事项如下：测定方法： 原理：过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质，产生有色化合物。在愈创木酚法中，POD催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4邻甲氧基苯酚，该物质在470 nm处有高光吸收，因此可利用比色法测量其活性。

准确的说是愈创木酚 愈创木酚法测定活性酶定操作 实验目的 过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性不断发生变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物体内代谢的变化。

B. POD溶液制备：在50mL 100mmol/L pH0的磷酸盐缓冲液中加入19uL愈创木酚，加热搅拌，溶解冷却后加入28uL 30%的H2O2即为POD反应液，放到冰箱保存。

含2％的聚乙烯吡咯烷酮），研磨，4℃ 8000 r/min离心20 min，上清液定容至5 ml。 POD活性测定按Kraus和FlETCher（1994）方法进行3 ml反应混合液中含0.2％愈创木酚0.95 ml，50 mmol L-1 PBS（pH0）1 ml，酶液0.05 ml，0.3％过氧化氢1 ml。记录1 min内470 nm下的光吸收值变化。

在什么情况下才测抗氧化酶活力

1、在研究生物抗氧化性时，测定抗氧化酶的活性是一个关键步骤。其中，SOD（超氧化物歧化酶）、POD（过氧化物酶）、CAT（过氧化氢酶）、APX（抗坏血酸过氧化物酶）的活性尤为重要，因为它们在生物体内的抗氧化反应中扮演着核心角色，通常会有显著的变化。

2、在动物实验中，通常会通过测定服用抗氧化剂一段时间后血液中丙二醛（MDA）的变化、以及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活力变化来评估抗氧化效果。根据这两种酶和MDA的变化情况，可以判断抗氧化的强度和效果。

3、过氧化氢酶（Catalase，CAT）是一种普遍存在于几乎所有生物体内的抗氧化酶，主要作用是催化过氧化氢（H2O2）分解为水和氧气，从而清除体内的过氧化氢，保护细胞免受其毒害。CAT的检测对于评估生物体的抗氧化防御机制及抗逆性具有重要意义。

4、小鼠在汽车尾气的胁迫下，3种抗氧化酶活性开始均随着胁迫程度的加重（如图1）而升高，这是生物适应环境的需要。但酶升高的程度和趋势并不完全相同：SOD和CAT在初期上升的较快，GSH-Px上升趋势较缓，说明生物能够适应一定污染的空气。

pod酶活性测定方法

1、OPD法检测POD酶活性 类似地，在1 mL离心管中，加入适量的H2OOPD、POD酶溶液和HAc-NaAc缓冲液。孵育条件、测量波长等参数根据OPD的特性进行调整（通常在447 nm处测量）。DAB法检测POD酶活性 在1 mL离心管中，加入适量的H2ODAB、POD酶溶液和HAc-NaAc缓冲液。

2、pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法 通过测定酶反应开始后某一时间段内（t1到t2）产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点：简单易行，对试剂要求不高。

3、POD测定：酶液稀释10倍，取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应，用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470，重复3次求平均值，以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD（超氧化物歧化酶活性）的测定 试剂：① 0.05mol/l磷酸缓冲液（PH值为8）。

4、.5 g叶片加入50 mmol L-1磷酸缓冲液（pH8，含2％的聚乙烯吡咯烷酮），研磨，4℃ 8000 r/min离心20 min，上清液定容至5 ml。

5、求教植物叶片POD酶活性的大致范围酶活性测定的原理：超氧物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）活性的测定 SOD采用氮蓝四唑（nitro-blue tetrazolium，NBT）法（Beauchamp和Fridovich，1971）。